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DNA鉴定——是牛肉
2008年07月03日  05:17:12    杭州网

昨天,“老牛”拿到了DNA鉴定报告。报告结论:“待检测样品为牛肉,不含有猪肉成分”。

历时一周的牛肉、猪肉之争终于有了结果,“老牛”花了2800元为自己讨回了一个清白。

事件回顾

6月23日下午,顾客李女士的老公在朝晖农贸市场买菜,从“老牛”的牛肉摊上买去7两牛肉,“老牛”帮他切成了肉丝。

当天傍晚,李女士端着肉
丝回去找到“老牛”,说老牛卖的不是牛肉,是猪肉。双方争执不下,最后商定,把肉丝包裹封存,留做鉴定(详见本报6月26日第6版)。

由于没找到能出具鉴定报告的行政部门,老牛主动联系了一家主要做亲子鉴定的基因技术有限公司。

6月26日下午,李女士和“老牛”,在市场管理人员和记者的见证下,一起取出那包牛肉丝,一起送去做DNA鉴定。在李女士声明不愿承担2800元鉴定费的情况下,老牛自己掏了鉴定费(详见本报6月27日第8版《这盘肉丝恐怕史上最贵 昨又付出两千八百》)

昨天上午,老牛拿到鉴定报告。

DNA技术如何证明老牛的清白?

博兴基因公司老总金博士为“老牛”那盘牛肉丝做了DNA实验,鉴定报告只有三页,满纸数据和术语,我一点看不懂。昨天上午,我在金博士闷热的实验室里,花了三个多小时向他请教,最后,听的人、说的人都满头大汗。

感谢金博士昨天连比带画不厌其烦地讲解,让我这个只有一点高中生物知识的人,稍稍弄懂了一丁点分子生物学和基因鉴定的操作方法。以下记者试着用最通俗的话,复述一下自己的理解(金博士也基本表示了认可)——

鉴定书上的原文:

关于一盒肉的鉴定报告

委托方:王群一

鉴定方:杭州博兴基因技术有限公司

委托事项:鉴定待鉴定的样品是牛肉还是猪肉

送检材料:A公认牛肉标样,B待鉴定肉样品,C公认猪肉标样

主要实验仪器:电子天平、恒温水浴锅,台式离心机,PCR仪,电泳仪,紫外检测仪,数码相机。

主要试剂:DNA提取液(本室自配)、酚/氯仿/异戊醇、Taq酶、DNA maker。

实验共分三个步骤。

第一步 DNA提取

1. 样品分别用刀片切碎,1.5ml 离心管中加入约100mg样品,加600 μlDNA提取溶液(pH8.0) 旋涡混匀,加入5μl 10mg/ml 蛋白酶K,56℃水浴60min;

2. 12000g离心5min,取上清转移到新的1.5ml管子中;

3. 加600μl酚:氯仿:异戊醇(25:24:1) 剧烈振荡,12000g 离心10min;

4. ……

这些步骤共6个程序,要花去两个多小时。通俗的解释是:

先是把上面的三种肉用小刀切成末,各取两个大米那么大的小块,放在大约有一粒花生米那么多的溶液里,加进去蛋白酶,放在56℃的温水里泡一小时,再放在每分钟12000转的离心机上拼命转,肉里的DNA连溶解带甩地就出来了,再加溶液,再甩……反复好几次,最后就得到比较纯的DNA水溶液了。

第二步 牛、猪源性成分P C R 检测

PCR 反应体系10 buffer(含Mg2+)2.5μl,dNTP终浓度100μM, 引物niuU、niuL (zhuU、zhuL)的终浓度均为0.2 mol/L 模板DNA 为1μl……94 变性30s 58℃ 退火30s 72℃延伸30s 32 个循环, 72℃延伸5min……

这一步其实就是为了证明刚才提出的DNA是好的,能用。

用的是电泳的方法——电泳就是在带电环境下,让DNA游泳。

DNA是一种核酸,核酸是带负电的,两边接上电极,它就会朝正极游过去。在规定时间里,块头大就游得慢,块头小就游得快。正常的DNA,一定时间会游到哪里,是有科学依据的。游得太快接近负极的,说明块头太小,块头小说明DNA片断已经分解了,比较碎,就不能用了。

金博士说,比如有些凶杀案,尸体腐败得太厉害,DNA就做不成,因为已经被微生物分解了。

第三步 PCR 产物的检测

取4μl PCR 产物在1.2% 琼脂糖凝胶和1X TAE缓冲液中电泳10min(200V)后,在凝胶成像系统中观察并拍照记录……

这一步的说明最少,但最难理解。金博士昨天花了一个多小时跟我解释,大概意思是分两步:

一把上面提取的三种DNA,放在一个预先定制的溶液里,这里面充满了牛的DNA单链片段。在一定的温度条件下,牛肉DNA,就会在这种环境里成几何倍地复制、扩增,扩到一定数目,就能电泳,在紫外灯照射下,能看到它们游到了一个特定的地方;而猪肉DNA,无法和牛DNA的单链配对,所以也没办法复制,它在电泳时就不会有任何表现。

然后,在充满猪的DNA单链片段的溶液里,牛的DNA也无法复制,所以也不会有任何表现。

实验结论:1. 待检测样品B为牛肉 2. 待检测样品B中不含有猪肉成分

小本经营,却花2800元证明自己的信誉、给顾客一个放心。这样的顶真,是值得称赞的。

鉴于此,快报在这里给“老牛”做一次形象宣传,帮他的摊位吆喝一下生意。

“老牛”,真名王群一,43岁,慈溪范市镇人;以前在老家卖牛肉,1992年结婚,老婆是同一个镇的;1995年和老婆来杭州,在朝晖农贸市场卖牛肉至今,很多顾客和经营户称他“老牛”。

“老牛”现在汽车南站附近租房,每天凌晨3点半起床,去近江农贸市场选货进货,早上6点拉到朝晖农贸市场摊位上;老婆负责卖,老牛负责给外面的饭店和单位订户送货。

“老牛”有一个女儿,在慈溪读书,下半年要上初三了;孩子前几天刚放暑假,老牛让老婆今天回家,把女儿接到杭州来玩。尽管离得不远,因为生意忙,他们一年回不了几趟家。

“老牛”的摊位在朝晖农贸市场2楼,29号包厢。

“老牛”说,二楼另外还有个29号摊位,是水泥柜台的,不是卖牛肉的;他的摊位是有卷闸门的,所以叫“包厢”,“包厢”没名字,招牌上只写着“牛肉专卖店”。

老牛答记者问

记:2800元大概相当于你卖多少牛肉?

“老牛”:一斤肉嘛,赚一块多钱,算一下,差不多两千斤吧。

记:为什么你一定要做鉴定?如果不做,这件事慢慢也会过去的。

“老牛”:那天我掏钱前,只要她说一句,这块有可能是牛肉,我也不想做了;她还一直说是猪肉么,那我就非做不可了!这不是钱的事情,是我卖肉十几年的名誉问题。

记:现在鉴定结果出来了,能否用一句话概括你现在的心情?

“老牛”:当然高兴了,因为这一下别人都相信我是清白的了。

记:如果让你做一个自我评价,你认为自己是一个什么性格的人?

“老牛”:我这个人有时是要钻牛角尖的,我认为对的事情,你要说不对,我死都不承认的。

记:你信奉的一句格言或座右铭是什么?(这个问题记者问了两遍,老牛说听不大懂,后来改成:你认为做人最重要的原则是什么?)

“老牛”:诚信最要紧,说话要算数。我看过一句话,从哪里看的忘记了。说第一等人,说过就能做到;第二等人,要写下来才能做到;第三等人,说过写过都不作数。

记:对那些经常光顾你摊位的顾客,你有什么话要说?

“老牛”:登报纸上电视那几天,来买的老顾客没比以前少,说明大家还是相信我的。

记:对那位李女士,你有什么话想对她说?

“老牛”:道歉的事情,总要给我一个说法了。钱的问题,最好能协商。如果她一分不出,道理上也讲不过去的。

愿意道歉 费用不出

顾客李女士的说法:

鉴定结果知道了,我是认可的。

道歉我也是愿意道歉的,错了就是错了,不管是当面道歉,还是在报纸上道歉,都可以的。

但是做DNA的鉴定费,我觉得我是不应该出的。

作为消费者,我有权利怀疑他卖的不是牛肉。而且又不是我一个人怀疑,很多人看过都说是猪肉。后来要做DNA,我也在事先说过,结果我认可,但是费用我不出的。

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来源:都市快报    作者:记者 何欣     编辑:郑海云    

 

 

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